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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
人胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
英文名稱 |
Primary human placental microvascular endothelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1489 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
胎盤是人類妊娠期間由胚膜和母體內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的器官。胎兒在中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。
1)細(xì)胞來源于人胎盤組織。
我們推薦使用 delf 原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
胎盤對胎兒的正常發(fā)育起著至關(guān)重要的作用,而良好的胎盤血管網(wǎng)絡(luò)的形成,是維持正常妊娠的前提。作為胎盤血管床的主要構(gòu)成部分之一,胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞參與胎盤血管形成與重塑、調(diào)節(jié)血管舒縮,在維持胎盤血管床的血流穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著重要作用。
2)細(xì)胞鑒定:血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
GL261/GFP小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞 |
PIRH2 Antibody Blocking Peptide |
chang liver人宮頸癌細(xì)胞 |
G422小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 |
GPC3 Antibody Blocking Peptide |
HPAF-II 人胰腺癌細(xì)胞 |
L929小鼠成纖維細(xì)胞 |
PRKAA2 Antibody Blocking Peptide |
HUVEC+GFP人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化+GFP |
NG108-15小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞 |
NCK2 Antibody Blocking Peptide |
KG-1人急性髓性白血病細(xì)胞 |
STC-1小鼠小腸細(xì)胞 |
Caspase-10 subunit p23/17 Antibody Blocking Peptide |
LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞 |
DI TNC1大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞 |
VEGFR2 Antibody Blocking Peptide |
MEG-01人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
UMR-106大鼠骨肉瘤細(xì)胞 |
ANG-2 Antibody Blocking Peptide |
NB 4急性早幼粒細(xì)胞株 |
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 |
Bax Antibody Blocking Peptide |
NCI-H446人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
EC-GI-10細(xì)胞 |
KCNJ8 Antibody Blocking Peptide |
OCM 1A人眼膜絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 |
COR-L47細(xì)胞 |
RHOG Antibody Blocking Peptide |
RBE人肝膽管癌細(xì)胞 |
647-V細(xì)胞 |
TMBIM1 Antibody Blocking Peptide |
SJSA-1人骨肉瘤細(xì)胞 |
ATN-1細(xì)胞 |
Phospho-EEF2 (Thr56 + Thr58) Antibody Blocking Peptide |
Snu-182人肝癌細(xì)胞 |
BICR6細(xì)胞 |
EIF3D Antibody Blocking Peptide |
T2 (174xcem.T2 )人淋ba母細(xì)胞 |
Ca9-22細(xì)胞 |
SCGN Antibody Blocking Peptide |
U266人骨髓瘤細(xì)胞 |
CoCM-1細(xì)胞 |
人胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞TMEM62 Antibody Blocking Peptide |