咨詢電話：18117197628
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
|
產(chǎn)品名稱 |
人胃黏膜上皮細(xì)胞 |
|
英文名稱 |
Primary human gastric mucosal epithelial cells |
|
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
|
貨號(hào) |
P-X1286 |
產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹：
胃是人體的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下層、肌層和外膜四層組成，并有神經(jīng)、血管和管的分布。其中胃粘膜上皮處于粘膜層的內(nèi)層，為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶對(duì)胃黏膜的損害。
1)細(xì)胞來源于人正常胃組織。
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小， 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
胃液主要是由胃蛋白酶和鹽酸所組成，胃液酸性很強(qiáng)，胃黏膜上皮覆蓋著一層 0.25-0.5mm的不溶性凝膠溶液，其中含有大量HCO3-，被稱為胃黏液-碳酸氫鹽屏障。它阻斷胃蛋白酶與上皮接觸，同時(shí)高濃度的HCO3-與鹽酸中和，防止了鹽酸對(duì)上皮的侵蝕，又抑制了胃蛋白酶的活性。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）或細(xì)胞角蛋白-19（CK-19）免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長(zhǎng)，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長(zhǎng)滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
|
ARIP胰腺癌 |
HCC1806-Luc熒光素酶標(biāo)記的人乳腺鱗狀癌細(xì)胞 |
phospho-HDAC7 (Ser358) Antibody Blocking Peptide |
|
RAW264.7+GFP小鼠單核巨噬細(xì)胞 |
抗AChEAE-1-Luc熒光素酶標(biāo)記的小鼠雜交瘤細(xì)胞 |
NR4A1 Antibody Blocking Peptide |
|
P19小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞 |
Caco-2直腸癌 |
CELA3A Antibody Blocking Peptide |
|
B16F10-PLV-LUC-PURO小鼠黑色素瘤 |
CHO-GS中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 |
TSHR Antibody Blocking Peptide |
|
L-M(TK-)小鼠結(jié)締組織細(xì)胞 |
SKG-IIIazi宮癌 |
PGBD3 Antibody Blocking Peptide |
|
MB49/LUC小鼠膀胱癌細(xì)胞 |
MC53小鼠腎系膜細(xì)胞 |
ZNF799 Antibody Blocking Peptide |
|
MFC/LUC小鼠前胃癌細(xì)胞 |
MHCC97-L低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞 |
Keratin 80 Antibody Blocking Peptide |
|
RGC5小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞株 |
HME1黑色素瘤細(xì)胞 |
ZNF257 Antibody Blocking Peptide |
|
266-6小鼠胰腺腺泡癌細(xì)胞 |
大鼠原代輸卵管上皮細(xì)胞 |
CaMKK1 Antibody Blocking Peptide |
|
COR-L88小細(xì)胞肺癌 |
人原代盲腸上皮細(xì)胞 |
C1GALT1 Antibody Blocking Peptide |
|
NCI-H1836小細(xì)胞肺癌 |
9L-B前列腺癌細(xì)胞 |
NUDT16L1 Antibody Blocking Peptide |
|
NCI-H847 [H847]小細(xì)胞肺癌 |
HCT-8/VCR耐長(zhǎng)春新堿結(jié)腸癌細(xì)胞 |
SNF8 Antibody Blocking Peptide |
|
KP4-2胰腺癌 |
大鼠原代胰腺星狀細(xì)胞 |
PCNA Antibody Blocking Peptide |
|
Panc 08.13胰腺導(dǎo)管腺癌 |
小鼠原代胰腺星狀細(xì)胞 |
NUP160 Antibody Blocking Peptide |
|
NCI-H23-Luc熒光素酶標(biāo)記的人非小細(xì)胞 |
大鼠原代心肌細(xì)胞 |
人胃黏膜上皮細(xì)胞MEG1 Antibody Blocking Peptide |