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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
人小腸粘膜上皮細(xì)胞 |
英文名稱 |
Primary human intestinal mucosal epithelial cells;HSIEpC |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1289 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。一般根據(jù)形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化將小腸分為三段,分別為十二指腸,空腸和回腸。
1)細(xì)胞來源于人正常小腸組織。
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
小腸壁結(jié)構(gòu)一般分 4層,由外向內(nèi)依次為:漿膜層,平滑肌層,粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層:靠近粘膜下層的是一層平滑肌,稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的粘膜。
小腸粘膜有縱行和橫行皺襞,并有無數(shù)細(xì)小的指狀突起,稱為絨毛。絨毛的基底處粘膜內(nèi)陷成管狀,稱為利貝屈恩氏隱窩。隱窩基底部的上皮細(xì)胞不斷地進(jìn)行有絲分裂,產(chǎn)生新細(xì)胞。隱窩上皮中還有許多杯狀細(xì)胞,它分泌粘液,起滑潤食物和保護(hù)粘膜的作用。
2)細(xì)胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
MBT-2-Luc熒光素酶標(biāo)記的小鼠膀胱癌細(xì)胞 |
人造血干細(xì)胞 |
Lypla1 Antibody Blocking Peptide |
大鼠腎小球系膜細(xì)胞 |
小鼠zi宮內(nèi)膜干細(xì)胞 |
INCENP Antibody Blocking Peptide |
人扁桃體上皮細(xì)胞 |
大鼠CD3+T淋ba細(xì)胞(陽選) |
PANK1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
小鼠表皮干細(xì)胞 |
GPR50/Melatonin Related Receptor Antibody Blocking Peptide |
大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
大鼠肌腱成纖維細(xì)胞 |
KLK15 Antibody Blocking Peptide |
兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 |
人zi宮內(nèi)膜成纖維細(xì)胞 |
TUSC5 Antibody Blocking Peptide |
人甲狀腺成纖維細(xì)胞 |
人膽脂瘤細(xì)胞 |
CORO2B Antibody Blocking Peptide |
人結(jié)腸成纖維細(xì)胞 |
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
GHITM Antibody Blocking Peptide |
兔脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
大鼠甲狀腺成纖維細(xì)胞 |
SKI Antibody Blocking Peptide |
人扁桃體靜脈平滑肌細(xì)胞 |
人心肌細(xì)胞 |
FABP2 Antibody Blocking Peptide |
人毛囊成纖維細(xì)胞 |
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 |
ITGAE Antibody Blocking Peptide |
兔舌表皮細(xì)胞 |
大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 |
HEPACAM2 Antibody Blocking Peptide |
大鼠胃黏膜成纖維細(xì)胞 |
人肺癌成纖維細(xì)胞 |
Phospho-TSC2 (Ser939) Antibody Blocking Peptide |
大鼠腸肌成纖維細(xì)胞 |
大鼠腦血管成纖維細(xì)胞 |
CDK1 Antibody Blocking Peptide |
大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
兔胃黏膜上皮細(xì)胞 |
人小腸粘膜上皮細(xì)胞Leucyl tRNA synthetase Antibody Blocking Peptide |