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產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
產(chǎn)品名稱 |
小鼠肌腱細(xì)胞 |
英文名稱 |
Mouse primary tendon cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1923 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹:
肌腱細(xì)胞是肌腱組織的基本功能單位,主要合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和糖蛋白基質(zhì),維持肌腱組織的新陳代謝。
肌腱損傷后的yu合方式包括內(nèi)源性yu合和外源性yu合,而理想的yu合方式是控制外源性yu合,促進(jìn)內(nèi)源性yu合。內(nèi)源性yu合的機(jī)制是肌腱細(xì)胞通過細(xì)胞自身的增殖從而促進(jìn)肌腱yu合,但目前肌腱細(xì)胞在體外經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后會喪失分裂增殖能力。
目前已知多種因素影響肌腱yu合過程,其中與肌腱yu合關(guān)系密切的有著重要調(diào)控作用的細(xì)胞因子主要有:堿性成纖維生長因子,轉(zhuǎn)化生長因子 β,骨形態(tài)發(fā)生蛋白-12,血管內(nèi)皮生長因子,胰島素樣生長因子-1,血小板源性生長因子等。
1) 組織來源于實驗動物的肌腱組織。
2) 細(xì)胞鑒定:Ⅰ型膠原免yi熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5) 細(xì)胞生長方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦使用 DELF原代 B** 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
產(chǎn)品的運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠脂肪干細(xì)胞 |
COR-L23細(xì)胞 |
MRPL32 Antibody Blocking Peptide |
U251 MG (KO)人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
EBC-1細(xì)胞 |
ZNF348 Antibody Blocking Peptide |
4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
FU-RPNT-2細(xì)胞 |
ZC3H18/NHN1 Antibody Blocking Peptide |
E14小鼠胚胎干細(xì)胞 |
GR-M細(xì)胞 |
POT1 Antibody Blocking Peptide |
LLC小鼠肺癌細(xì)胞 |
HCC-1588細(xì)胞 |
GJC2 Antibody Blocking Peptide |
NCTC1469(NCTC CLONE 1469)小鼠正常肝細(xì)胞 |
HL-60Clone15細(xì)胞 |
ESCO1 Antibody Blocking Peptide |
SDOW-17小鼠雜交瘤 |
Hs888T細(xì)胞 |
RHCE Antibody Blocking Peptide |
CFSC-8B大鼠肝星形細(xì)胞 |
IA-LM細(xì)胞 |
MIPEP Antibody Blocking Peptide |
RIN-m5f大鼠β胰島素瘤細(xì)胞 |
NCI-H1618細(xì)胞 |
phospho-EZH2 (Ser21) Antibody Blocking Peptide |
COS-7非洲綠猴腎細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化 |
MPC-11細(xì)胞 |
DIS3L Antibody Blocking Peptide |
143B細(xì)胞 |
Kelly細(xì)胞 |
PRR12 Antibody Blocking Peptide |
AML-193細(xì)胞 |
KP-2細(xì)胞 |
MMP19 Antibody Blocking Peptide |
BICR3細(xì)胞 |
LCLC-97TM1細(xì)胞 |
AAV5 coat protein VP1 Antibody Blocking Peptide |
C8166細(xì)胞 |
LU65A細(xì)胞 |
CtBP1 Antibody Blocking Peptide |
CMK-11-5細(xì)胞 |
MEL細(xì)胞 |
小鼠肌腱細(xì)胞CENPK Antibody Blocking Peptide |