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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠皮下微血管內(nèi)皮細胞 |
英文名稱 |
Mouse primary subcutaneous microvascular endothelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1915 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細胞介紹:
微血管內(nèi)皮細胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染、休克、腫瘤、血管ji病等多種ji病和綜合癥發(fā)展的病理基礎。一旦微血管內(nèi)皮細胞受損,必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細胞正常的生物學功能,引起多種ji病的發(fā)生。微血管內(nèi)皮細胞間連接與血管通透性有著非常密切的關系。微血管內(nèi)皮細胞合成與分泌前列環(huán)素、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質,來維持血管的正常狀態(tài)。
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2)細胞鑒定:血管假性血友病因子(vWF)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調整為(2~5)×105 cells/ml,或實驗所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質, 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質很充足, 也很難使細胞適應從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質供應不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠T淋ba瘤細胞(雞OVA基因修飾)E.G7-OVA(種屬鑒定) |
B16-F10小鼠黑色素瘤細胞 |
MYPT1 Antibody Blocking Peptide |
原代角質形成細胞培養(yǎng)體系 |
GL-261小鼠膠質細胞瘤 |
C9orf171 Antibody Blocking Peptide |
原代成骨細胞培養(yǎng)體系 |
MB49小鼠膀胱癌細胞 |
SPERT Antibody Blocking Peptide |
原代肥大細胞培養(yǎng)體系 |
OKT11小鼠雜交瘤(抗CD2)細胞 |
GOPC Antibody Blocking Peptide |
原代CIK細胞培養(yǎng)體系 |
TC-1小鼠肺上皮細胞 |
ZNF32 Antibody Blocking Peptide |
DMEM/F12(無糖)基礎培養(yǎng)基 |
C6大鼠腦膠質瘤細胞 |
PCCB Antibody Blocking Peptide |
馬血清(國產(chǎn)) |
PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞 未分化 |
RBM6 Antibody Blocking Peptide |
無血清細胞凍存液 |
VERO 非洲綠猴腎細胞 |
ART5 Antibody Blocking Peptide |
L-丙酰胺-L-谷氨酰胺 |
HEY人卵巢癌細胞 |
CHCHD2 Antibody Blocking Peptide |
10×多聚賴氨酸 |
HCMEC/D3永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞 |
Phospho-5-LOX (Ser663) Antibody Blocking Peptide |
重組人白細胞介素-4 |
769-P人腎細胞腺癌細胞 |
F11 heavy chain Antibody Blocking Peptide |
人成纖維細胞生長因子2 |
ACHN人腎細胞腺癌細胞 |
DPPA2 Antibody Blocking Peptide |
支原體高效劑 2000 × |
Caco-2人結腸腺癌細胞 |
PLA2G3 Antibody Blocking Peptide |
水浴鍋**劑,500 × |
COV434人卵巢顆粒腫瘤細胞 |
Recombinant SARS-Cov-2 Spike RBD protein (L452R,T478K), His (HEK293) |
SCC-7 小鼠鱗狀細胞癌細胞 |
FTC-133人甲狀腺癌細胞 |
小鼠皮下微血管內(nèi)皮細胞PIK3R2 Antibody Blocking Peptide |