咨詢電話:18117197628
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠髓核細(xì)胞 |
英文名稱 |
Mouse primary nucleus pulposus cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1899 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞介紹:
髓核是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常椎間盤組織。
推薦使用 DELF原代 軟骨 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
髓核細(xì)胞的過早衰老與凋亡是導(dǎo)致椎間盤退行性變過程的主要原因之一,主要表現(xiàn)為退變椎間盤內(nèi)髓核細(xì)胞功能降低和數(shù)量減少,使得其 Ⅱ型膠蛋白聚糖等基質(zhì)分泌量下降,終導(dǎo)致椎間盤維持脊柱高度、承受各方應(yīng)力等生物力學(xué)功能喪失。
2)細(xì)胞鑒定:Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:梭形或多角形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人前列腺上皮細(xì)胞 |
SBC-2 (STR)人小細(xì)胞 |
MARK1 Antibody Blocking Peptide |
U251 MG/TMZ+LUC(3000)人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞 |
MP46人眼葡萄膜黑色瘤細(xì)胞 |
KLHDC7B Antibody Blocking Peptide |
HO-8910人卵巢癌細(xì)胞 |
MJ人原發(fā)性皮膚T細(xì)胞 |
WWOX Antibody Blocking Peptide |
WSU-DLCL-2人彌漫大B淋ba瘤細(xì)胞 |
16HBE HBE135-E6E7 [ATCC® CRL-2741] (STR)人支氣管上皮樣細(xì)胞 |
Dab1 Antibody Blocking Peptide |
U-138MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞 |
hEM15A (STR)人zi宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞 |
PASD1 Antibody Blocking Peptide |
WI-38 (STR)人胚肺成纖維細(xì)胞 |
HCC1143乳腺癌 |
DEX Antibody Blocking Peptide |
HEK-293T-ACE2人胚腎細(xì)胞 |
JIMT-1乳腺癌 |
TLR3 Antibody Blocking Peptide |
HDF-a (STR)人皮膚成纖維 |
HS-ES-2M上皮樣肉瘤 |
KIF18B Antibody Blocking Peptide |
HUVEC/RFP (STR)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
EAC小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞 |
MCSF Receptor Antibody Blocking Peptide |
MCF-7/GFP (STR)人乳腺癌細(xì)胞 |
SNU-16胃癌 |
FAM171B Antibody Blocking Peptide |
MCF-12A人乳腺上皮細(xì)胞 |
G-402腎細(xì)胞癌 |
CRISP11 Antibody Blocking Peptide |
LCC18人神經(jīng)分化的結(jié)腸癌細(xì)胞 |
KYSE-70食管鱗狀細(xì)胞癌 |
FBXO32 Antibody Blocking Peptide |
Caki-2/GFP人腎透明細(xì)胞 |
BICR 31頭頸部鱗狀細(xì)胞癌 |
phospho-Gli1 (S112/ T115/ S116) Antibody Blocking Peptide |
HRCEC人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
SCC-25頭頸部鱗狀細(xì)胞癌 |
Phospho-CEBPB (Thr235) Antibody Blocking Peptide |
SNU-520人胃癌細(xì)胞 |
ECC12胃癌 |
小鼠髓核細(xì)胞IL6 Antibody Blocking Peptide |