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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Rat liver parenchymal cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號(hào) |
P-X1569 |
細(xì)胞介紹：
隨著人們生活水平的提高，飲食習(xí)慣的改變，腫瘤發(fā)病率也在不斷的增加，如肝癌、胃癌和大腸癌等明顯增加的趨勢(shì)。肝臟作為人體重要的器官，在整個(gè)物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的功能。肝臟也是體內(nèi)yao物代謝的重要器官，體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境對(duì)yao物代謝等的影響是不言而喻的。
但是在體研究yao物或其它化學(xué)物質(zhì)在肝細(xì)胞代謝的分子機(jī)制有一定的困難，因此我們建立體外的原代肝細(xì)胞培養(yǎng)模型用于肝細(xì)胞分子生物學(xué)特征的研究，作為對(duì)在體肝臟研究模型的有益補(bǔ)充。采用改良的灌流方法將肝臟中的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離、純化、體外培養(yǎng)，**分析原代肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能狀態(tài)，為肝細(xì)胞分子生物學(xué)特征的研究以及新藥對(duì)肝臟的作用機(jī)制的研究提供更有價(jià)值的線索，以更好的解釋yao物作用的機(jī)制。
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常肝組織。
2)細(xì)胞鑒定：葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase)化學(xué)染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf 原代肝實(shí)質(zhì) 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長(zhǎng)，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長(zhǎng)滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小， 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來(lái)說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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HCC827人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
H157人口腔鱗狀上皮癌細(xì)胞 |
phospho-HSF1 (Ser307) Antibody Blocking Peptide |
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SNU-1105腦部多形性成釉細(xì)胞瘤 |
A2780+GFP人卵巢癌細(xì)胞 |
NMDAR1 Antibody Blocking Peptide |
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PC-3/nKR前列腺癌 |
K562AZQR人慢性骨髓性白血病細(xì)胞 |
Histone H3 (acetyl K27) Antibody Blocking Peptide |
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KOPN-8人B淋ba細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
KP-N-YN人腦神經(jīng)母細(xì)胞 |
GPR27 Antibody Blocking Peptide |
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JM人T淋ba細(xì)胞 |
EJ人膀胱癌細(xì)胞 |
NBPF3 Antibody Blocking Peptide |
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SK-N-DZ人成神經(jīng)瘤細(xì)胞 |
GP293 (STR)人胚腎細(xì)胞 |
EMR1/F4/80 Antibody Blocking Peptide |
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U87 MG/LUC (STR)人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
CCC-HEH-2 (STR)人胚胎心肌組織來(lái)源細(xì)胞 |
Recombinant human ANO1 protein, His |
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calu-1-luc-EGFP人肺癌細(xì)胞 |
MSC-LUC-PURO人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 |
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263) Antibody Blocking Peptide |
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Li-7 (STR)人肝癌細(xì)胞 |
ACC-M人涎腺癌細(xì)胞 |
SLC17A3 Antibody Blocking Peptide |
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HL-7702人肝細(xì)胞 |
SGC7901/DDP (STR)人胃癌順鉑耐藥株 |
DPCR1 Antibody Blocking Peptide |
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143B/RFP (STR)人骨肉瘤細(xì)胞 |
MDA-MB-175 VII (STR)人乳腺癌細(xì)胞 |
SCGB2A1 Antibody Blocking Peptide |
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TF-1 (STR)人紅系白血病細(xì)胞 |
MDA-MB-134-VI (STR)人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
TRA2A Antibody Blocking Peptide |
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CEM/C1 (STR)人急性淋ba細(xì)胞 |
BE(2)-M17 (STR)人神經(jīng)母細(xì)胞 |
SPEM1 Antibody Blocking Peptide |
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Nthy-ori 3-1 (STR)人甲狀腺正常細(xì)胞 |
Phoenix-AMPHO人腎上皮細(xì)胞 |
CD14 Antibody Blocking Peptide |
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HCT-116+OX耐藥(8ug/mLOxaliplatin)人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
KYSE-410人食管鱗癌細(xì)胞 |
大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞AIMP2 Antibody Blocking Peptide |