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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 |
英文名稱 |
Primary rat bone marrow mesenchymal stem cells,rbmsc |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1663 |
產(chǎn)品規(guī)格:>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格:1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
操作步驟如下:
細(xì)胞介紹:
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常骨髓血組織。
我們推薦使用 Delf 間充質(zhì)干 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潛能,能促進(jìn)間充質(zhì)組織的再生,如:骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱、脂肪及基質(zhì)等組織。在骨髓中,BMSCs占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%~0.1%,含量極低。
而同時(shí),由于組織工程需要大量的種子細(xì)胞,從嚙齒類動(dòng)物骨髓分離BMSCs的技術(shù)上的難度限制了許多實(shí)驗(yàn)的開展。體外分離培養(yǎng)純度高、活力強(qiáng)、生物特性均一的BMSCs對(duì)組織工程及細(xì)胞的體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)顯得至關(guān)重要。
2)細(xì)胞鑒定:CD44免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
KNRK大鼠正常腎細(xì)胞 |
小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
PPM1E Antibody Blocking Peptide |
K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人胰腺神經(jīng)腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
phospho-H1FOO (Ser20) Antibody Blocking Peptide |
MC38+LUC小鼠結(jié)腸癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
人骨骼肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
XRN1 Antibody Blocking Peptide |
MPC-5小鼠腎足細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
大鼠毛囊干細(xì)胞永生化細(xì)胞細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
LY75 Antibody Blocking Peptide |
P815小鼠肥大瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
SET1A Antibody Blocking Peptide |
RM-1+LUC小鼠前列腺癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
Matrigel基質(zhì)膠(相關(guān)2) |
NKD2 Antibody Blocking Peptide |
TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代上皮細(xì)胞添加劑 |
Keratin 36 Antibody Blocking Peptide |
CBRH7919大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代軟骨細(xì)胞添加劑 |
SmarcAL1 Antibody Blocking Peptide |
INS-1大鼠胰島瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
角質(zhì)細(xì)胞無血清培養(yǎng)基 |
Recombinant human FASN protein |
RH-35大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)培養(yǎng)基 |
FTH1 Antibody Blocking Peptide |
CHO-K1中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢k1 亞克隆系 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代肌腱細(xì)胞添加劑 |
RanBP3 Antibody Blocking Peptide |
B95-8EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
SLC4A5 Antibody Blocking Peptide |
Duck embryo鴨胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代周細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
RDH10 Antibody Blocking Peptide |
人膽囊上皮細(xì)胞永生化+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
LGALS1 Antibody Blocking Peptide |
豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
原代B淋ba細(xì)胞培養(yǎng)體系 |
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞RANBP3L Antibody Blocking Peptide |