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細(xì)胞介紹：
頸靜脈存在于脊椎動物頸部的靜脈。血管內(nèi)皮細(xì)胞層是血液和其它組織的天然屏障。內(nèi)皮細(xì)胞同時會合成和分泌凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的增強(qiáng)和抑制物，以及影響血小板粘附和聚集的媒介物。它們同時也會分泌控制細(xì)胞增殖的蛋白來維持血管壁的健康。內(nèi)皮細(xì)胞會分泌 t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及響應(yīng)TNF-α，繼而分泌細(xì)胞因子GM-CSF，表達(dá)ICAM-1表面抗體，產(chǎn)生大量的一氧化氮和endothelin。原代靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Rat jugular vein endothelial cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X1548 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞特性：
1） 組織來源于實(shí)驗動物正常的頸靜脈組織。
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2） 細(xì)胞鑒定：血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子（PECAM-1/CD31）或血管假性血友病因子（vWF）免yi熒光染色為陽性。
3） 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5） 細(xì)胞生長方式：梭形，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒炈杳芏?，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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KP-N-YN人腦神經(jīng)母細(xì)胞 |
人羊膜上皮細(xì)胞 |
CTSD Antibody Blocking Peptide |
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大鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
人小膠質(zhì)細(xì)胞 |
phospho-c-ABL (Tyr245) isoform b (1149aa) Antibody Blocking Peptide |
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小鼠牙齦成纖維細(xì)胞 |
大鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞 |
Recombinant mouse CD24 protein, C-mFc (HEK293) |
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小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞 |
小鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞 |
JAK1 Antibody Blocking Peptide |
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人肺成纖維細(xì)胞 |
大鼠肝間質(zhì)細(xì)胞 |
HDAC4 + 5 + 9 Antibody Blocking Peptide |
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人肝動脈平滑肌細(xì)胞 |
大鼠前列腺上皮細(xì)胞 |
ACTG2 Antibody Blocking Peptide |
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人直腸成纖維細(xì)胞 |
大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 |
LPHN3 Antibody Blocking Peptide |
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人結(jié)腸上皮細(xì)胞 |
大鼠zi宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 |
NDUFS8 Antibody Blocking Peptide |
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人甲狀腺成纖維細(xì)胞 |
小鼠腹腔主動脈平滑肌細(xì)胞 |
Recombinant HPV16 E7 protein, DsbC & His |
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人輸卵管上皮細(xì)胞 |
小鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞 |
PPAR Gamma Antibody Blocking Peptide |
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人睪丸支持細(xì)胞 |
大鼠前脂肪細(xì)胞 |
HDDC2 Antibody Blocking Peptide |
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人毛囊角質(zhì)細(xì)胞 |
大鼠椎體終板軟骨干細(xì)胞 |
leucine-enkephalin/L-enk Antibody Blocking Peptide |
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人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞 |
大鼠腦膜細(xì)胞 |
PTGER3 Antibody Blocking Peptide |
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人內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
大鼠嗅鞘細(xì)胞 |
ZAR1L Antibody Blocking Peptide |
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人牙齦成纖維細(xì)胞 |
大鼠鞏膜上皮細(xì)胞 |
大鼠頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞TP53TG5 Antibody Blocking Peptide |