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細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常卵巢組織。
2)細(xì)胞鑒定:卵泡刺**受體(FSHR)免yi熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞 |
英文名稱(chēng) |
Rat primary ovarian granulosa cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號(hào) |
P-X1624 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹:
卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官。卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇激su。它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠?,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、管和神經(jīng)。
卵巢是分泌雌激su的主要器官。卵巢分泌的雌激su主要是雌二醇。卵巢中顆粒細(xì)胞是合成雌激su的場(chǎng)所。其產(chǎn)生過(guò)程是使雄烯二酮轉(zhuǎn)變成雌激su:內(nèi)膜細(xì)胞在 LH的作用下,使膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)樾巯┒?;顆粒細(xì)胞在FSH的作用,發(fā)育過(guò)程中產(chǎn)生芳香化酶,它使雄烯二酮轉(zhuǎn)變成雌激su。形成的雌激su分泌到卵泡液和血液中。
我們推薦使用 Delf 原代卵巢顆粒 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開(kāi)始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項(xiàng):
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)低, 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小, 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過(guò)程。 如果接種的細(xì)胞密度過(guò)大,會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類(lèi)似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用, 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴(lài)性細(xì)胞來(lái)說(shuō),盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
MDA-MB-134-VI (STR)人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
Duck embryo鴨胚胎成纖維細(xì)胞 |
TUBGCP6 Antibody Blocking Peptide |
NCI-H661[h661]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
A129L細(xì)胞 |
HCCS Antibody Blocking Peptide |
P53R [JHU-56] 人結(jié)直腸癌細(xì)胞 |
B16-F1細(xì)胞 |
OBFC2B Antibody Blocking Peptide |
RT112人膀胱癌細(xì)胞 |
BpRc1細(xì)胞 |
SECTM1 Antibody Blocking Peptide |
SK-MEL-2人皮膚黑色素瘤細(xì)胞 |
CCD-1097Sk細(xì)胞 |
OR5AR1 Antibody Blocking Peptide |
SW982 [SW-982]人滑膜肉瘤細(xì)胞 |
COLO668細(xì)胞 |
SHOC2 Antibody Blocking Peptide |
TE-12人食管癌細(xì)胞 |
CT26CL25細(xì)胞 |
ODAM Antibody Blocking Peptide |
WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
F-36P細(xì)胞 |
GDF6 Antibody Blocking Peptide |
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
KMS-28BM細(xì)胞 |
CYP2A7 Antibody Blocking Peptide |
H22小鼠肝癌細(xì)胞 |
JHH-4細(xì)胞 |
Phospho-Ret (Tyr1062) Antibody Blocking Peptide |
MC38+LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 |
GM04281C細(xì)胞 |
FHL2 Antibody Blocking Peptide |
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
HCC1143細(xì)胞 |
PSD4 Antibody Blocking Peptide |
TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞 |
HCC38細(xì)胞 |
Protein A / PE |
INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
HPAF-II細(xì)胞 |
PLOD2 Antibody Blocking Peptide |
CHO-K1中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞k1 亞克隆系 |
HT-144細(xì)胞 |
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞COTL1 Antibody Blocking Peptide |