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細(xì)胞介紹:
髓核是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。髓核細(xì)胞的過早衰老與凋亡是導(dǎo)致椎間盤退行性變過程的主要原因之一,主要表現(xiàn)為退變椎間盤內(nèi)髓核細(xì)胞功能降低和數(shù)量減少,使得其 Ⅱ型膠蛋白聚糖等基質(zhì)分泌量下降,終導(dǎo)致椎間盤維持脊柱高度、承受各方應(yīng)力等生物力學(xué)功能喪失。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠髓核細(xì)胞 |
英文名稱 |
Rat nucleus pulposus cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1653 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常椎間盤組織。
我們推薦使用 Delf 原代軟骨 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細(xì)胞鑒定:Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:梭形或多角形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏龋盅b于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠原代腦微血管周細(xì)胞 |
NCI-H2405細(xì)胞 |
SERINC1 Antibody Blocking Peptide |
GB-1細(xì)胞 |
NCI-H820細(xì)胞 |
TREM1 Antibody Blocking Peptide |
HARA細(xì)胞 |
OCI-AML-2細(xì)胞 |
INO80B Antibody Blocking Peptide |
HCC2218細(xì)胞 |
P116細(xì)胞 |
phospho-EGFR (Tyr1016) Antibody Blocking Peptide |
HMV-II細(xì)胞 |
PK-45P細(xì)胞 |
KIAA1107 Antibody Blocking Peptide |
HS-ES-2M細(xì)胞 |
RERF-LC-AI細(xì)胞 |
PECI Antibody Blocking Peptide |
J558細(xì)胞 |
SK-ES-1細(xì)胞 |
PRR23A Antibody Blocking Peptide |
KMS-21BM細(xì)胞 |
SNU-1406細(xì)胞 |
HSPA9 Antibody Blocking Peptide |
KS-1細(xì)胞 |
A172人膠質(zhì)母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
FBLL1 Antibody Blocking Peptide |
LL97A(AIMy)細(xì)胞 |
5637人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
Phospho-SATB1 (Ser47) Antibody Blocking Peptide |
LU99C細(xì)胞 |
SNU-333細(xì)胞 |
KIF5C Antibody Blocking Peptide |
MH-22A細(xì)胞 |
SNU-80細(xì)胞 |
LC3B Antibody Blocking Peptide |
MX-1細(xì)胞 |
SW1573細(xì)胞 |
MALT1 Antibody Blocking Peptide |
NCI-H1672[H1672]細(xì)胞 |
TK10細(xì)胞 |
ZNF568 Antibody Blocking Peptide |
NCI-H2023細(xì)胞 |
VMRC-RCZ細(xì)胞 |
大鼠髓核細(xì)胞C9orf150 Antibody Blocking Peptide |