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公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠心肌成纖維細(xì)胞 |
英文名稱 |
Rat cardiac fibroblasts |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1530 |
操作步驟如下:
細(xì)胞介紹:
1)組織來源于實驗動物的正常心臟組織。
我們推薦使用 Delf 原代成纖維 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細(xì)胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細(xì)胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低, 細(xì)胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品:
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團或分散的單個細(xì)胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計數(shù)板進行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
心臟中,心肌成纖維細(xì)胞約占正常心肌組織細(xì)胞總數(shù)的 60%-70%,是心臟中非心肌細(xì)胞的主要組成部分,廣泛存在于心臟組織中,包圍心肌細(xì)胞,連接心肌細(xì)胞間質(zhì),與缺血性心臟病、炎癥、肥大、梗死等病理狀態(tài)密切相關(guān)。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式:長梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度, 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說,盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細(xì)胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細(xì)胞迅速黏附于底物,待細(xì)胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
兔原代肝卵圓細(xì)胞 |
人肝星狀細(xì)胞 |
HAPLN2 Antibody Blocking Peptide |
V79 (倉鼠肺細(xì)胞) |
兔滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞 |
OTUD1 Antibody Blocking Peptide |
DH82 (犬巨噬細(xì)胞/狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞) |
兔尿道平滑肌細(xì)胞 |
DNAJC5G Antibody Blocking Peptide |
Pt K1 [NBL-3] (袋鼠腎細(xì)胞) |
小鼠前列腺上皮細(xì)胞 |
LGALS9 Antibody Blocking Peptide |
MADB106 (大鼠乳腺癌細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
大鼠輸尿管上皮細(xì)胞 |
FSIP1 Antibody Blocking Peptide |
RL1 (大鼠肺成纖維樣細(xì)胞) |
小鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞 |
TGFB1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞 |
大鼠軟骨細(xì)胞 |
c-fos Antibody Blocking Peptide |
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞 |
大鼠毛囊細(xì)胞 |
EEF1A1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞 |
大鼠骨髓單核細(xì)胞 |
phospho-Ep300 (Ser89) Antibody Blocking Peptide |
兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞 |
大鼠胸腺淋ba細(xì)胞 |
phospho-ROCK1 (Thr455/Ser456) Antibody Blocking Peptide |
兔膀胱成纖維細(xì)胞 |
小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 |
SLC12A1 Antibody Blocking Peptide |
小鼠外周血白細(xì)胞 |
人前脂肪細(xì)胞 |
PRLR Antibody Blocking Peptide |
兔主動脈平滑肌細(xì)胞 |
大鼠角膜上皮細(xì)胞 |
DHFR Antibody Blocking Peptide |
兔zi宮平滑肌細(xì)胞 |
大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
Recombinant human Lamin A/C protein, GST & His |
人直腸黏膜上皮細(xì)胞 |
大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
大鼠心肌成纖維細(xì)胞MEPE Antibody Blocking Peptide |