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推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf 原代心肌 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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產(chǎn)品名稱 |
大鼠心肌細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Rat cardiomyocytes |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號(hào) |
P-X1527 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
操作步驟如下：
細(xì)胞介紹：
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常心臟組織。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會(huì)導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
公司正在出售的產(chǎn)品：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)細(xì)胞鑒定：肌球蛋白重鏈(MHC)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式：長柱狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
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兔原代睪丸間質(zhì)細(xì)胞 |
小鼠zi宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
LRBA Antibody Blocking Peptide |
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大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 |
小鼠脂肪干細(xì)胞 |
RABL4 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 |
小鼠單核細(xì)胞 |
SSX8 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 |
小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
ARRB1 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠角質(zhì)形成細(xì)胞 |
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 |
NAIF protein 1 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠肌腱干細(xì)胞 |
小鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞 |
INSM1 Antibody Blocking Peptide |
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大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
兔肺成纖維細(xì)胞 |
CREBBP Antibody Blocking Peptide |
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大鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞 |
兔主動(dòng)脈弓平滑肌細(xì)胞 |
DES Antibody Blocking Peptide |
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大鼠鼓膜上皮干細(xì)胞 |
兔脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
EMC9 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
兔皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
MTSS1 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
兔結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 |
ADRM1 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠胃平滑肌細(xì)胞 |
兔腎小管上皮細(xì)胞 |
PHKA1 Antibody Blocking Peptide |
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小鼠腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 |
兔甲狀腺成纖維細(xì)胞 |
Gastrin (1-17) Active Peptide |
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小鼠輸尿管成纖維細(xì)胞 |
兔zi宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 |
TKFC Antibody Blocking Peptide |
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小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞 |
兔滑膜成纖維細(xì)胞 |
大鼠心肌細(xì)胞Multimerin 2 Antibody Blocking Peptide |