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細胞介紹:
大鼠主動脈內(nèi)皮細胞( aortic endothelial cells)組成了主動脈內(nèi)壁,并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細胞在切應(yīng)力的作用下,分泌不同的內(nèi)皮因子并進而影響血管收縮和生長。主動脈內(nèi)皮細胞也調(diào)節(jié)細胞黏附分子的表達來控制和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代主動脈內(nèi)皮細胞可有效地幫助研究者研究內(nèi)皮功能失調(diào)的機理,動脈粥樣化等ji病的發(fā)病機理以及發(fā)展新的zhi療方法。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠主動脈內(nèi)皮細胞 |
英文名稱 |
Rat aortic endothelial cells;RAEC |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X1531 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常主動脈組織。
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)皮 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細胞鑒定:血小板-內(nèi)皮細胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應(yīng)體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠腎小球內(nèi)皮細胞 |
HCC2935非小細胞肺癌 |
TRPC3 Antibody Blocking Peptide |
CLS-54非小細胞肺癌 |
HCC4006非小細胞肺癌 |
Recombinant human IL-15 protein (Active, HEK293) |
COR-L105非小細胞肺癌 |
HCC-78非小細胞肺癌 |
C1orf114 Antibody Blocking Peptide |
COR-L23非小細胞肺癌 |
HCC-95非小細胞肺癌 |
ENOSF1 Antibody Blocking Peptide |
COR-L23/CPR非小細胞肺癌 |
HLC-1非小細胞肺癌 |
Ghrelin 28 [Ser26 (n-octanoyl)] Active Peptide |
COR-L23/R非小細胞肺癌 |
HOP-92非小細胞肺癌 |
IL17F Antibody Blocking Peptide |
DV-90非小細胞肺癌 |
HROBML03非小細胞肺癌 |
SIP1 Antibody Blocking Peptide |
EBC-1非小細胞肺癌 |
IA-5非小細胞肺癌 |
ZPLD1 Antibody Blocking Peptide |
HARA非小細胞肺癌 |
LCAM1非小細胞肺癌 |
SHC4 Antibody Blocking Peptide |
HARA-B非小細胞肺癌 |
LC-2/ad非小細胞肺癌 |
TAF1C Antibody Blocking Peptide |
HCC-1171非小細胞肺癌 |
IA-LM非小細胞肺癌 |
C5AR2 Antibody Blocking Peptide |
HCC-1195非小細胞肺癌 |
KNS-62非小細胞肺癌 |
SH3GL3 Antibody Blocking Peptide |
HCC-1588非小細胞肺癌 |
LC-1/sq非小細胞肺癌 |
SerpinB6 Antibody Blocking Peptide |
HCC-2108非小細胞肺癌 |
LC-1/sq-SF非小細胞肺癌 |
phospho-SMAD2 (Ser250) Antibody Blocking Peptide |
HCC-2279非小細胞肺癌 |
LC-1F非小細胞肺癌 |
大鼠主動脈內(nèi)皮細胞MED28 Antibody Blocking Peptide |