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產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
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產(chǎn)品名稱 |
羊骨骼肌細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Primary sheep skeletal muscle cells |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號(hào) |
P-X2301 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹：
骨骼肌細(xì)胞（Skeletal muscle cells）是人和動(dòng)物體內(nèi)大的細(xì)胞之一，它們是由成肌細(xì)胞(Myoblasts)融合而來的多核細(xì)胞，故骨骼肌的形成是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，并需要多種細(xì)胞信號(hào)通路的參與，包括phosphatidylinositol 3-kinase，calcineurin，STAT3和MAPK等。原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化過程的有效的模型。
1）細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物羊正常肌肉組織。
我們推薦使用 原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)原代骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，雖然被分散成單個(gè)細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對(duì)細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小， 雖然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2）細(xì)胞鑒定：肌動(dòng)蛋白（α-actin）免yi熒光染色為陽性。
3）經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭狀細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長(zhǎng)，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長(zhǎng)滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時(shí)初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時(shí)細(xì)胞可能會(huì)受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用， 會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長(zhǎng)的難度相應(yīng)增加。 對(duì)于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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兔內(nèi)皮祖細(xì)胞 |
OCUB-F乳腺癌 |
PNP Antibody Blocking Peptide |
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Hs 739.T乳腺癌 |
OCUB-M乳腺癌 |
CPLX2 Antibody Blocking Peptide |
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IOWA-1T乳腺癌 |
SNU-1528乳腺癌 |
GMPS Antibody Blocking Peptide |
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JC乳腺癌 |
SNU-1581乳腺癌 |
I5D Antibody Blocking Peptide |
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JIMT-1乳腺癌 |
SNU-2372乳腺癌 |
NDUF3 Antibody Blocking Peptide |
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MCF-7乳腺癌 |
SNU-334乳腺癌 |
ChRM3 Antibody Blocking Peptide |
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MDA-MB-157乳腺癌 |
UACC-2087乳腺癌 |
ZNF740 Antibody Blocking Peptide |
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MDA-MB-231乳腺癌 |
UACC-3199乳腺癌 |
ValRS Antibody Blocking Peptide |
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MDA-MB-415乳腺癌 |
GOTO神經(jīng)母細(xì)胞瘤 |
Caspase-12 Antibody Blocking Peptide |
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MDA-MB-436乳腺癌 |
CHP-212神經(jīng)母細(xì)胞瘤 |
WAPL Antibody Blocking Peptide |
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MDA-MB-453乳腺癌 |
MDA-MB-231/luc (STR)乳腺癌細(xì)胞 |
ERK1/2 Antibody Blocking Peptide |
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MDA-MB-468乳腺癌 |
HS-ES-2M上皮樣肉瘤 |
STXBP5 Antibody Blocking Peptide |
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MMT 060562乳腺癌 |
VA-ES-BJ上皮樣肉瘤 |
C9ORF91 Antibody Blocking Peptide |
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MRK-nu-1乳腺癌 |
KALS-1神經(jīng)膠質(zhì)瘤 |
CRABP1 Antibody Blocking Peptide |
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NF639乳腺癌 |
BE(2)-C神經(jīng)母細(xì)胞瘤 |
羊骨骼肌細(xì)胞CCZ1 Antibody Blocking Peptide |