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產(chǎn)品規(guī)格：>5×105細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格：1ml凍存細(xì)胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
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產(chǎn)品名稱 |
豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
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英文名稱 |
Pig pulmonary microvascular endothelial cells；pPMEC |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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貨號 |
P-X2252 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞介紹：
肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。它還具有代謝功能，可以執(zhí)行一定的非呼吸功能。在肺損傷中，肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞是活性氧類的重要靶細(xì)胞之一。
在肺炎的發(fā)生過程中，神經(jīng)體液介質(zhì)和氧化劑作用于內(nèi)皮細(xì)胞，使得細(xì)胞間隙滲透性增加，蛋白質(zhì)由血液進(jìn)入間質(zhì)。細(xì)胞間隙滲透性的增加導(dǎo)致低氧血癥，出現(xiàn)成ren呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。
1)細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常肺組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD31免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)jun、酵母和真jun。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 Delf原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下：
1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng)：細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
注意事項：
1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時，雖然被分散成單個細(xì)胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細(xì)胞能否存活是非常重要的。在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)， 使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低， 細(xì)胞之間的促生長作用很小， 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足， 也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足， 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細(xì)胞時細(xì)胞可能會受到嚴(yán)重的損傷。適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度， 給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細(xì)胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細(xì)胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破，分離細(xì)胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大，在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細(xì)胞來說，盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h，由于細(xì)胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液， 細(xì)胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁， 是細(xì)胞迅速黏附于底物，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細(xì)胞培養(yǎng)法—懸浮型細(xì)胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人乳腺癌（腫瘤）細(xì)胞 |
BW5147小鼠淋ba瘤細(xì)胞 |
PYCR1 Antibody Blocking Peptide |
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GL261/OVA/LUC小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
EL-4EL4小鼠淋ba瘤細(xì)胞 |
NARG2 Antibody Blocking Peptide |
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MC-38/RFP小鼠結(jié)腸癌帶紅色熒光 |
L1210/LUC小鼠淋ba細(xì)胞 |
KLH / FITC |
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MC-38/GFP小鼠結(jié)腸癌帶綠色熒光 |
SCC7/LUC小鼠鱗狀細(xì)胞 |
phospho-RUNX2 (Ser451) Antibody Blocking Peptide |
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CT26/LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 |
SCC7小鼠鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 |
Phospho-ELk1 (Ser389) Antibody Blocking Peptide |
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MC-38/OVA小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 |
MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 |
FGD5 Antibody Blocking Peptide |
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A9小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞 |
ID8/LUC小鼠卵巢癌細(xì)胞 |
DSTYK Antibody Blocking Peptide |
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L-M(TK-)小鼠結(jié)締組織細(xì)胞 |
G422/GFP小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 |
KIR2DL3/CD158b2 Antibody Blocking Peptide |
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GC-2 spg小鼠精母細(xì)胞 |
MC3T3-E1/GFP小鼠胚胎成骨細(xì)胞 |
GOLGA2 Antibody Blocking Peptide |
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GC-2spd(ts)小鼠精母細(xì)胞 |
MB49-PLV-LUC-PURO小鼠膀胱癌細(xì)胞 |
PTTG Antibody Blocking Peptide |
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GC-1 spg小鼠精原細(xì)胞 |
G422/LUC小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 |
KPNA3 Antibody Blocking Peptide |
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moc1美國特殊渠道**小鼠口腔鱗狀細(xì)胞 |
Neuro-2a/LUC小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 |
SPACA4 Antibody Blocking Peptide |
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moc2美國特殊渠道**小鼠口腔鱗狀細(xì)胞 |
bEnd.3 [BEND3]小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 |
CDK7 Antibody Blocking Peptide |
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SVEC4-10小鼠淋ba結(jié)上皮細(xì)胞 |
bEnd1小鼠內(nèi)皮瘤細(xì)胞 |
PSMG1 Antibody Blocking Peptide |
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L5178Y TK+/- clone小鼠淋ba瘤細(xì)胞 |
MB49/LUC小鼠膀胱癌細(xì)胞 |
豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞AANAT Antibody Blocking Peptide |