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細胞介紹:
視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道。
視網(wǎng)膜色素上皮參與視黃醇循環(huán),吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性。
包裝規(guī)格:1ml凍存細胞懸液或T-25培養(yǎng)瓶
產(chǎn)品名稱 |
豬視網(wǎng)膜色素上皮細胞 |
英文名稱 |
Porcine retinal pigment epithelial cells |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
貨號 |
P-X2286 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常眼組織。
我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
操作步驟如下:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
注意事項:
1)原代培養(yǎng)的分離細胞在初次接觸體外環(huán)境時,雖然被分散成單個細胞,但它們之間的互相影響還是存在的, 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì), 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低, 細胞之間的促生長作用很小, 雖然營養(yǎng)物質(zhì)很充足, 也很難使細胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入獨立生存環(huán)境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足, 代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-8(CK-8)免yi熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細胞懸液用計數(shù)板進行細胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒炈杳芏?,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
2)原代培養(yǎng)時初始培養(yǎng)在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度, 給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用, 會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞適應(yīng)體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3)由于細胞之間的相互的內(nèi)在聯(lián)系被打破,分離細胞在體外培養(yǎng)時經(jīng)歷的生存環(huán)境改變很大,在體外存活和生長的難度相應(yīng)增加。 對于貼壁依賴性細胞來說,盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 3h 到 5h,由于細胞懸液中帶有少量培養(yǎng)液, 細胞即可以維持存活, 又可以很快接觸到培養(yǎng)瓶底壁, 是細胞迅速黏附于底物,待細胞貼壁后,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
3、分離細胞培養(yǎng)法—懸浮型細胞培養(yǎng) 。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人鼻腔上皮細胞RPMI 2650 (STR鑒定正確) |
兔原代腦微血管周細胞 |
phospho-ARP3 (Ser418) Antibody Blocking Peptide |
兔原代鞏膜成纖維細胞 |
人原代脾臟單核細胞 |
OXT Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代肺動脈成纖維細胞 |
大鼠原代腸道干細胞 |
EDN1 Antibody Blocking Peptide |
人原代下腔靜脈外膜成纖維細胞 |
人原代胰腺成纖維細胞 |
SPTBN3 Antibody Blocking Peptide |
人原代喉黏膜上皮細胞 |
小鼠原代卵泡膜細胞 |
GOLGA8H Antibody Blocking Peptide |
人原代頸靜脈球瘤細胞 |
大鼠原代腎集合管上皮細胞 |
CAV1 Antibody Blocking Peptide |
綿羊原代II型肺泡上皮細胞 |
小鼠原代胰腺腺泡細胞 |
NPY4R Antibody Blocking Peptide |
兔原代鼓膜上皮干細胞 |
山羊原代卵巢顆粒細胞 |
C22orf40 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代腦血管周細胞 |
綿羊原代軟骨細胞 |
CARD18 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代真皮毛細胞 |
大鼠原代角膜內(nèi)皮細胞 |
BBS10 Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代骨膜干細胞 |
小鼠原代脊髓神經(jīng)元細胞 |
RTEL1 Antibody Blocking Peptide |
人原代增生性瘢痕成纖維細胞 |
小鼠原代結(jié)腸成纖維細胞 |
TDGF1 Antibody Blocking Peptide |
兔原代T淋ba細胞 |
人原代食管成纖維細胞 |
MC1R Antibody Blocking Peptide |
兔外周血單個核細胞(PBMC) |
小鼠原代牙周膜干細胞 |
phospho-c-Myb (Ser532) Antibody Blocking Peptide |
人原代甲狀旁腺細胞 |
人原代腹膜間皮細胞 |
豬視網(wǎng)膜色素上皮細胞NHLH1 Antibody Blocking Peptide |